胰蛋白酶是細胞培養(yǎng)實驗中常見的一種試劑，他在細胞培養(yǎng)實驗中怎樣才能發(fā)揮該有的作用呢？又該如何進行實驗呢？讓我們一起來看看！

作用：
1.胰蛋白酶是一種消化酶，可分解許多脊椎動物消化系統(tǒng)中的蛋白質(zhì)，它存在于胰液中。
2.質(zhì)膜上的蛋白質(zhì)負責多種功能，這些功能對于維持細胞的正常生理活動至關(guān)重要。
3.一些質(zhì)膜蛋白（如鈣粘蛋白家族）是粘附蛋白，可作為錨，將細胞骨架蛋白連接到細胞外基質(zhì)。這有助于細胞粘附和細胞遷移。
4.在細胞培養(yǎng)物中，可以將胰蛋白酶添加到培養(yǎng)基中，通過消化粘附蛋白從培養(yǎng)皿表面釋放貼壁細胞。
5.胰蛋白酶還通過消化粘附蛋白從聚集體中釋放細胞。
6.EDTA也與胰蛋白酶一起添加到細胞培養(yǎng)物中，以螯合培養(yǎng)基中的二價離子。鈣和鎂離子可能抑制胰蛋白酶的作用。
7.最終，胰蛋白酶有助于從細胞培養(yǎng)物中獲得單個細胞，促進細胞的下游處理。

操作步驟：

1.吸取培養(yǎng)基，用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以除去殘余的血清。

2.加入適量的胰蛋白酶消化液，略蓋過細胞即可。根據(jù)細胞的特性可以增加或減少胰酶用量，室溫放置30秒至2分鐘。

3.顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化呈白茫狀;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來。

4.此時吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的細胞培養(yǎng)液，吹打下細胞，即可直接用于 后續(xù)實驗。如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入胰酶細胞消化液重新消化。

注意事項：

1.-20℃保存，冰袋運輸，至少1年有效。

2.應根據(jù)不同組織和細胞的性質(zhì)確定最佳消化時間和胰蛋白酶的用量，消化時間不宜過長，以免影響細胞的活力。

3.解凍后宜分裝使用，避免反復凍融。